農(nóng)藥殘留速測儀測定原理以及方法介紹

    1、農(nóng)藥殘留速測儀檢測原理

　　

　　農(nóng)殘速測儀檢測原理是采用酶抑制法，在一定條件下。有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制膽堿酯酶的活性，其抑制率與農(nóng)藥的濃度星正相關(guān)11-21。在正常情況下，酶催化代謝產(chǎn)物水解．其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計在410am處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率的大小可以判斷樣品中是否有高劑量的有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

　　

　　2、農(nóng)殘速測方法

　　

　　2．1試劑配制與保存

　　

　　2．1．1緩沖液。用量筒量取500mL蒸餾水，先用少量（100一150mL）的蒸餾水緩緩倒入放有緩沖劑干粉的量杯中，用玻棒攪拌至*溶解后將量筒中剩余的蒸餾水倒人量杯中充分攪拌（搖勻），待用。

　　

　　2．1．2顯色劑。用刻度吸管吸5．2mL緩沖液注入顯色劑瓶中，蓋上蓋搖勻，置于0—5℃環(huán)境中備用，切勿冷凍。

　　

　　2．1．3底物。用刻度吸管吸5．2mL蒸餾水注入底物干粉瓶中，蓋上蓋搖勻，置于嘰5cc環(huán)境中備用。

　　

　　2．2樣液制備

　　

　　取干凈的蔬菜，用天平準確稱取2g，葉菜取葉片部分，果菜橫截削下一片，葉片、瓜肉等剪成Icm2，置于100mL小燒杯內(nèi)；用吸管吸10mL緩沖液注入小燒杯中，振蕩提取2min左右；提取結(jié)束后靜置2—3min，取上層清液作為樣液。

　　

　　2．3儀器操作與樣品測定

　　

　　2．3．1儀器預(yù)熱。接通電源，儀器自檢，自檢結(jié)束后待機預(yù)熱10min．儀器工作穩(wěn)定后進行測量13-71。

　　

　　2．3．2對照測定。向檢測板zui左排比色孔中用的移液槍分別加10卜L酶試劑，再用250斗L移液槍吸取250斗L緩沖液于比色孔，按上下鍵選擇‘啟動振板’菜單后按‘確認’鍵啟動振板10S，振板結(jié)束后。讓酶試劑和緩沖液混合液靜置反應(yīng)10min，用的移液槍向比色孔分別加入lO斗L顯色劑和10斗L底物，立即將檢測板放入托盤，按‘對照’鍵測量（反應(yīng)時間設(shè)為lmin）。測試結(jié)束，按‘確認’鍵顯示對照吸光度變化值。待空白對照值的吸光度變化值在0．15加．30，才可測定樣品。否則要重新做空白測定。測量結(jié)束后儀器自動保存當(dāng)前的對照值，下一次測量樣品時就可以

　　

　　2．3．3樣品測定。若已完成各通道的對照測試，將檢測板上所有比色孔作為樣品測量。用不同移液槍分別給比色孔加酶液10‘L／孔，加注樣品液250斗【／孔，顯色劑lO斗L／孔。操作步驟同對照測試，zui后按‘樣品’鍵測量，測試結(jié)束后，顯示當(dāng)前測量的樣品抑制率結(jié)果和吸光度變化值?？筛鶕?jù)需要打印被測樣品抑制率。

　　

　　2．3．4測試結(jié)果的判定。測定結(jié)果以抑制率表示。根據(jù)GB／T5009．199—2003判定要求，當(dāng)樣品對酶的抑制率≥50％時，表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果。陽性結(jié)果的樣品需重復(fù)測2次以上。